漢口新四軍軍部舊址現貌。
1937年7月7日，日本侵略者制造震驚中外的盧溝橋事變，發動全面侵華戰爭。為了抗擊日本帝國主義的侵略，中國共產黨同國民黨談判達成協議，將南方8省14個地區的紅軍和紅軍游擊隊改編為國民革命軍陸軍新編第4軍（簡稱新四軍），并決定由葉挺任新四軍軍長。
為順利推進新四軍籌建工作及軍部選址問題，葉挺于10月下旬前往延安，向中共中央報告新四軍情況。毛澤東親切接見葉挺，向其講明當前的國際國內形勢，同時對新四軍的軍部選址問題作出明確指示：“軍暫駐武漢，南昌、福州設辦事處”。
延安之行結束后，葉挺于11月12日返回武漢，開始了新四軍軍部正式組建工作。由于經費緊張，葉挺傾向于將軍部設在漢口日租界內，主要考慮抗戰爆發后，日僑已悉數撤走，他們的房產已被查封。另外，八路軍武漢辦事處設在漢口中街89號（今長春街57號），中共中央長江局機關就設在辦事處內，新四軍軍部靠近這里，便于今后溝通協調工作。
選址期間，葉挺帶領工作人員在漢口日租界內反復考察，一條街一條街地轉、一棟房子一棟房子地比較。通過反復權衡，最終選定位于大和街26號（今漢口勝利街332-335號）的一幢二層住宅樓。這里距離八路軍武漢辦事處步行僅需幾分鐘。當時，這幢住宅樓處于無人居住狀態，葉挺親自帶人開鎖啟封，隨后懸掛“新四軍籌備處”的牌子。
12月14日，中共中央決定成立中共中央東南分局，以加強南方游擊區黨的工作，項英任書記。12月23日，項英、賴傳珠等一批被派往新四軍工作的干部抵達武漢，與葉挺、張云逸等共同商討和部署新四軍的組編工作。12月25日，葉挺、項英在大和街26號召開新四軍干部大會。會上，葉挺、項英分別報告了現階段的形勢任務、南京和上海淪陷的經過和原因，并部署了相關工作。這次會議，標志著新四軍軍部在漢口正式成立。大和街26號掛出的“新四軍籌備處”牌子正式替換成“國民革命軍陸軍新編第四軍”的牌子。
緊接著，葉挺、項英為盡快建立新四軍的領導機構，接待、調配了大批從延安來的干部，配備了新四軍軍部各處、科干部，有效解決了新四軍各支隊集中整編、干部任命、隸屬關系和后勤給養等問題。
1938年1月4日至6日，因戰事需要，新四軍軍部由武漢移駐南昌。隨著干部陸續到達，司令部、政治部和后勤機構逐步建立。1月28日，《新華日報》刊登新四軍軍部啟事：“本軍奉命即行整編出發，軍部當即移駐南昌，前漢口大和街26號軍部即行結束。以后駐漢辦事處事宜，委托八路軍駐漢辦事處錢處長代辦。所有一切公文、信電，請逕投南昌三眼井本軍部為荷。”至此，漢口軍部駐地作為新四軍第一個軍部駐地的歷史使命正式完成。
新四軍軍部遷至南昌后，漢口新四軍軍部改為新四軍駐漢辦事處，由八路軍武漢辦事處處長錢之光兼任主任，負責國共雙方的聯系，請領和轉運軍需物資等工作。1938年10月武漢淪陷后，漢口新四軍軍部舊址成為居民住房。2006年4月，武漢市人民政府撥專款按新四軍軍部舊址原貌修復，辟為紀念館。同年12月，該紀念館正式對外開放。這段塵封了60余年的歷史遺跡，又重新呈現在世人面前。